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显微镜照明

所有频繁,先进的和装备精良的的显微镜无法产生出色的图像由于不正确使用的光源,这通常会导致样本光照不足。优化时,标本的照明应明亮,无眩光,并均匀分散在视野。


有无数的光源提供照明显微镜,常规观测和关键显微摄影,。一个Zui常见的光源,因为其成本低,寿命长,是50或100瓦的卤钨灯,如显微镜图1,图的基础所示,其中还详细介绍了在一个典型的现代透射光显微镜的光通路。在这个数字中,钨卤素灯发出连续光谱的光,在3200 K(一个9伏特的灯泡电压设置时),然后通过集热器和现场镜头前通过反映到台下冷凝器到标本。显微镜物镜成像的光线被捕获,并传递到目镜或分光镜分为几个摄像头的港口之一。整个光学显微镜途径,照明,并通过一系列的隔膜和镜头集中旅行,因为它从源头上照亮标本,然后进入目镜或相机附件。对准显微镜的光学元件,以优化在现代显微镜的照明进行了以下规则科勒照明。讨论如何为适当的科勒照明对齐传输和反射光显微镜的更多细节在我们的路段设立一个显微镜透射光,反射光。上面的图1所示的光学通路是一个透射光显微镜的典型,并涉及一些镜头,隔膜,反光镜和分光镜直接通过显微镜的光。


 

透射光之路

 

探讨如何控制在显微镜透射光的光通路。

 

入门教程»

卤钨灯在3200度(大约在9伏时)为中心的彩色光谱比较明亮,但要求颜色转换过滤器,以提高他们的色温日光等价。另一种流行的光源是75至150瓦的氙气灯,因为其亮度非常高,寿命长,相对甚至整个视觉光谱的输出,和色温接近日光胶片乳剂所需。凡要求非常高的光强度,锡卤化物灯是经常被使用。 100瓦或200瓦的汞燃烧器在荧光显微镜下,特别是关键显微摄影的目的,往往采用。往年,碳弧灯或锆灯??泡可能已被使用,但这些来源也很少看到今天。欲了解更多信息和广泛用于显微镜照明灯的详细讨论,请访问我们的显微镜和显微摄影的光源部分。


对准通过在反射光显微镜的光通路的源照明也是首要关注的,特别是与金相,半导体晶片检测,并显着的新进展,在荧光显微镜。反射光显微镜也照亮了各种光源(如上所述),并可以调整Zui佳性能,使用科勒照明。这是科勒照明配置的部分反射光显微镜更详细的讨论。反射光显微镜的照明通路也几个互动的Java教程,包括一个链接直接在下面的主题。


 

反射光通路

 

探索如何反映在显微镜光学通路控制。

 

入门教程»

在他出色的书“通过显微镜摄影”,约翰Delly认为提交的竞赛,展览,和科学出版物的所有显微照片,80至90%是正确对齐导致贫困样品照明的光学的受害者。这是与一般的显微镜和显微摄影Zui常见的问题之一,并在许多大学实验室的学生显微镜进行突击检查将揭示丰富台下冷凝器和照明光源不佳调整。我们怀疑台下冷凝器和视场光阑在整个范围在一个给定的显微镜的目标,不正确的路线和调整,是在显微摄影中的错误的Zui大来源。


适当的照明的必要性怎么强调也不过分。很多时候,一个25,000美元的显微镜是减少手放大镜水平照明和校准不当,造成显微照片是由一个显微镜下科勒照明的Zui佳条件下$ 2000所采取的超越。在本科勒照明及其实施的理论(包括传输和反射光)处理底漆配套部分,我们讨论的显微镜配置的关键方面,并包括多种交互式Java教程,帮助学生掌握这些重要的概念。


Afocal或Nonfocused照明 - 照明系统,没有形成在某个光源的光通路的形象,被称为afocal或nonfocused照明。前发明的电灯泡,显微镜有限,他们选择适合显微镜照明来源。白天,他们可以指向天空,他们的显微镜(或台下反射镜),使用云作为原油扩散屏幕照明均匀遍布整个视野。仪器制造商也地面的镜子生产,努力增加对象平面的光强度凹反光表面。云和蓝天,本身容易成像显微镜的光学通路内的光源,从而afocal照明来源。室内和晚上的工作,迫使早期的显微镜依靠人工光源的照明,由于固有的这些来源产生的温度较低的颜色,呈现不同强度,不同色彩,不同的色调比试样的颜色是在自然光线下观察。为了弥补这一点,显微镜蓝色的过滤器使用的各类改变明显的人工光源的色温密切配合,自然采光。然而,没有形成一个光源光路内的某处的形象,这些照明的各种早期方法仍落入afocal或nonfocused照明类。


早期的调查显示,日光和人工光源之间的旋转时,有实事求是地讲,在光学字符或图像的力量解决没有明显的变化,提供了客观的回镜头是完全采光。后来,科学家们发现,Zui重要的要求是至少等于客观的照度数值孔径。在十九世纪,新的照明光源的发展,一个新的“源”集中“(后来被称为关键或Nelsonian照明)方法,以改善显微镜光照条件。


临界(或Nelsonian)照明 - 这种显微镜的照明方法Zui早是由英国显微镜爱德华尼尔森使用恩斯特阿贝先进的光学原理。 Nelsonian照明使用显微镜从十九世纪后,直到进入二十世纪非常成功。今天,仍然有一些关键的照明主张继续使用需要外部光源的显微镜,或用便宜的学生显微镜,显微摄影是不是一个问题。


Nelsonian照明依赖于使用台下冷凝器产生的火焰的重点形象,从燃烧的油灯标本了几分甚至光照条件下实现整个视场的平面(或其他同质化的光源)。考虑这种照明方法时,光源均匀性的重要方面。所产生的火焰燃烧的灯是相当均匀一致,但其他来源,如磨砂放大器灯泡,乳白灯泡,或带状丝也可以用于为关键照明。图2说明了关键的照明用一个假设的油灯,提供了一个均匀的照明光源的光学的途径。


必须从油灯的火焰发出的光聚焦显微镜台下聚光器(见图2),以便在microslide标本平面火焰的形象。在实践中,往往很难(或不可能)找到在中央部分的火焰的焦点,因此,“边缘”的火焰通常是与台下镜的后续调整的重点,使图像的中央部分火焰填补了视野。 (如果存在)通常是连接外部的视场光阑,进入显微镜的光量可以控制。足够的光线进入显微镜必须完全填充的客观背板,这样就可以通过适当调整冷凝器光圈控制。聚焦在样品平面光源不稳定,往往能产生一个有颗粒状,凹凸不平,或有斑点的背景。这是可以克服的,稍微散焦显微镜台下聚光器,以产生更均匀的背景。在很大程度上被Nelsonian照明显微镜的照明效率高得多科勒方法所取代。


科勒照明 - 这个主题将在另一段引物更详细讨论,但在这里我们将简要地触摸后,主要的方面。科勒照明光源的形象是集中在冷凝器光圈生产的标本或对象的平面平行光(而散)。低于冷凝器的光源(光圈)的一个放大的图像,产生了广泛的照明锥试样的Zui佳分辨率。冷凝器光圈的大小,可用于控制数值孔径的光锥,照亮样本和减少不必要的杂散光及眩光。此外,冷凝器的玻璃表面的灰尘和其它缺陷的成像是Zui小化。


高效的样品照明是非常正确对齐后,在显微镜的光学元件,包括照明光源的依赖。严重的显微镜应成为熟悉每个组件的调??整范围,并应调整不同的样本和目标,这些做法。照度不均匀显微照片质量有严重影响,造成的“热点”,晕影,彩色条纹,对比度差,和各种其他不良影响。一些Zui新的显微镜都配备了“为中心的前灯”,不允许调整,有的甚至供应冷凝器,没有横向调整机制。重要的是要确保这些显微镜在出厂前在显微摄影,为适当的科勒照明对齐。请仔细阅读显微镜的使用说明书和/或问题,你的工厂如何将这些显微镜的照明进行了优化的重要细节的技术代表。

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